Golenhar Genomics

• Abbiamo scoperto che l’enoxaparina si legava a entrambe le varianti proteiche con affinità simile rispetto al ligando GAG naturale eparan solfato (con valori di Kd compresi tra 600-680 nM).
• Utilizzando frammenti di enoxaparina di una certa dimensione, abbiamo trovato il legame ottimale  dp6 o dp8 per la proteina Spike a lunghezza intera, mentre l’RBD non ha mostrato una  catena di affinità dipendente dalla lunghezza significativa per gli oligosaccaridi dell’eparina.
• È stato scoperto che il recettore solubile ACE2 interagisce con GAG non frazionati nell’intervallo µM Kd basso, ma con eparine di una certa dimensione con valori Kd chiaramente inferiori a µM. È interessante notare che l’analogo strutturale  dell’eparina, il pentosano polisolfato (PPS),  ha mostrato un’elevata affinità di legame con entrambe le varianti di Spike e con il recettore ACE2.
• Negli esperimenti con l’infezione virale, sia l’enoxaparina che la PPS hanno mostrato una forte inibizione dell’infezione nell’intervallo di concentrazione di 50-500 µg / ml. È stato riscontrato che entrambi i composti mantengono i loro effetti inibitori a 500 µg / ml nell’espettorato umano naturale, simile a una biomatrice.
• I nostri dati suggeriscono un trattamento topico precoce dell’infezione da SARS-CoV-2 con enoxaparina per via inalatoria; alcuni studi clinici in questa direzione sono già in corso e suggeriscono inoltre l’inattivazione virale profilattica orale o nasale da parte di enoxaparina o PPS per prevenire la trasmissione virale interpersonale.

Un anticorpo umano rivela un sito conservato sulle proteine ​​spike del beta-coronavirus e conferisce protezione contro l’infezione da SARS-CoV-2.

Le mutazioni nel dominio di legame del recettore della   proteina  spike umana  SARS CoV-2 ne    aumentano l’affinità per il legame del     recettore ACE-2 umano

1. L’infezione da virus della sindrome respiratoria acuta-2 (SARS CoV-2) ha causato l’attuale pandemia globale. Il legame del dominio di legame del recettore della proteina spinosa SARS CoV-2 (RBD) al recettore-2 dell’enzima di conversione dell’angiotensina umana (ACE-2) provoca l’infezione dell’ospite. La proteina spike ha subito diverse mutazioni rispetto al ceppo iniziale isolato a dicembre 2019 da Wuhan, in Cina. Molti di questi ceppi mutanti sono stati segnalati come  varianti di interesse e come varianti monitorate. Alcuni di questi mutanti sono noti per essere responsabili della maggiore trasportabilità del virus.
2. Il motivo dell’aumento della capacità di trasmissione causata dalle mutazioni puntiformi può essere compreso esaminando le implicazioni strutturali e le interazioni intermolecolari nel legame della proteina della punta virale RBD e dell’ACE-2 umano. Qui usiamo la struttura cristallina RBD nel complesso con ACE-2 disponibile nel pubblico dominio e analizziamo 250 ns simulazioni di dinamica molecolare (MD) wild-type e mutante; K417N, K417T, N440K, N501Y, L452R, T478K, E484K e S494P. Sono state caratterizzate le interazioni ioniche, idrofobiche e di legame idrogeno, la flessibilità dei residui di amminoacidi, le energie di legame e i cambiamenti strutturali. Le simulazioni MD forniscono indizi sui meccanismi molecolari del legame del recettore ACE-2 nei complessi wild-type e mutanti. Le proteine ​​​​spike RBD mutanti erano associate a una maggiore affinità di legame per il recettore ACE-2.

Diversi tipi di iperfluorescenza osservati nei  pattern angiografici post-anti-VEGF con fluoresceina  nella retinopatia dei neonati pretermine

Per dimostrare che le caratteristiche demografiche e terapeutiche della retinopatia dei neonati prematuri (ROP) degli occhi hanno mostrato diversi tipi di iperfluorescenza nell’angiografia con fluoresceina (FA) inizialmente trattata con farmaci anti-fattore di crescita endoteliale vascolare (VEGF).

Successive serie di casi di ROP trattati con farmaci anti-VEGF sono state studiate retrospettivamente. Tutti i pazienti sono stati sottoposti al test AF almeno 6 mesi dopo il trattamento. Sono state analizzate le caratteristiche demografiche e terapeutiche degli occhi con o senza iperfluorescenza in FA. I diversi tipi di iperfluorescenza sono classificati in tre gruppi, tra cui perdita vascolare, membrana fibrosa e anomalie vascolari.

Sono stati inclusi duecentoquarantadue occhi di 123 pazienti con ROP che richiedevano un trattamento. L’iperfluorescenza è stata determinata in 51/242 occhi e per loro sono state effettuate 2,08 ± 1,11 iniezioni, mentre gli occhi senza  iperfluorescenza hanno ricevuto 1,65 ± 0,80 iniezioni (  p   = 0,013). La perdita vascolare è stata definita in 26/51  occhi con iperfluorescenza.

L’età postmestruale (PMA) della prima iniezione nel gruppo dell’iperfluorescenza era di 38,56 ± 3,24 settimane, che era precedente a quella dei bambini non iperfluorescenti (  p   = 0,011). Ulteriori procedure aggiuntive sono state eseguite su occhi con iperfluorescenza (23,53 vs 3,66%,   p   = 0,000). Tra questi, gli occhi con perdita vascolare richiedevano un trattamento aggiuntivo rispetto agli occhi senza perdita (42,31 vs 4,00%,   p   = 0,004). Per 26 occhi con perdita vascolare in 11 occhi, 8 pazienti hanno ricevuto un ulteriore trattamento durante il follow-up. Non è stato possibile determinare alcuna differenza significativa nell’errore di rifrazione tra i diversi gruppi.

L’ECCEZIONE CHE CONFERMA LA REGOLA: IN CHE MODO LA CHELATAZIONE DEL SODIO PUÒ ALTERARE LA CORRELAZIONE DEL LEGAME CELLULARE DI CARICA MEDIANTE IMMAGINI MULTIMODALI A BASE DI  FLUORESCINA

• In questo caso, gli idrogel peptidici a base di Fmoc a base di RGD sono stati modificati con nanopolvere di idrossiapatite (Hap) come nanofiller per creare idrogel nanocompositi.
• La microscopia a forza atomica ha mostrato che le nanoparticelle Hap adornano le nanofibre peptidiche con uno schema ripetitivo, risultando in idrogel più rigidi con proprietà meccaniche migliorate rispetto ai controlli senza Hap e RGD.
• Inoltre, questi nanocompositi hanno supportato l’adesione  di macrofagi grezzi 264.7 e la loro differenziazione 2D in OC maturi, definiti adottando la tipica morfologia OC  (presenza di un anello di actina, multinucleazione e membrana plasmatica rugosa). Infine, dopo 7 giorni di coltura, gli OC hanno mostrato una maggiore espressione di TRAP, un tipico marcatore di differenziazione degli OC.
• Presi insieme, i risultati suggeriscono che l’idrogel Hap / Fmoc-RGD ha il potenziale per l’ingegneria del tessuto osseo come modello 2D per studiare la compromissione o la sovraregolazione della differenziazione OC.
• SIGNIFICATO: L’alterata  funzione degli osteoclasti (OC) è una delle principali cause di fratture ossee nelle malattie più comuni dell’apparato scheletrico  (es. osteoporosi).
• Gli idrogel peptidici possono fungere da piattaforma per imitare il microambiente osseo e fornire uno strumento per valutare la differenziazione e la funzione di OC.
• Inoltre, gli idrogel possono contenere vari nanofiller per ottenere biomateriali ibridi con proprietà meccaniche migliorate e migliore citocompatibilità.
• Qui, gli idrogel peptidici a base di Fmoc a base di RGD sono stati decorati con nanoparticelle di idrossiapatite (Hap) per generare un idrogel con proprietà reologiche migliorate.
• Inoltre, sono in grado di supportare l’osteoclastogenesi delle cellule Raw264.7 in vitro, come confermato dai cambiamenti morfologici e dall’espressione dei marcatori OC. Pertanto, questo idrogel decorato con Hap può essere utilizzato come modello per l’efficace differenziazione di OC e potenzialmente per lo studio della disfunzione

Sintesi ottimizzata di Fmoc-1-omopropargillicina-OH